2021, Vol. 42
文章信息
- 闫慧, 赵静, 刘德军, 陈光辉.
- Yan Hui, Zhao Jing, Liu Dejun, Chen Guanghui
- 河南省2 110例宫颈癌患者人乳头瘤病毒感染状况分析
- Analysis on human papillomavirus infection in 2 110 patients with cervical cancer in Henan province
- 中华流行病学杂志, 2021, 42(5): 914-917
- Chinese Journal of Epidemiology, 2021, 42(5): 914-917
- http://dx.doi.org/10.3760/cma.j.cn112338-20200729-00992
-
文章历史
收稿日期: 2020-07-29
2. 河南省人民医院检验科, 郑州 450003
2. Department of Clinical Laboratory, Henan Provincial People's Hospital, Zhengzhou 450003, China
宫颈癌是严重威胁女性健康的常见恶性肿瘤。据WHO 2019年的数据统计，宫颈癌全球新发病例近57万，死亡病例约31万，是15~44岁女性中仅次于乳腺癌的第二大恶性肿瘤[1]。我国的宫颈癌现状同样不容乐观，新发病例数超过全球的1/5，死亡病例数约占全球的1/6[2]。
现有研究已证实，约99%的宫颈癌是由人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染引起[3-4]。目前已发现的HPV亚型有200多种，其中约40种与泌尿生殖系统感染相关，根据这40种HPV亚型致癌性的大小又分为低危型和高危型，高危型主要引起宫颈癌等恶性疾病[5-7]。河南省宫颈癌发病率和死亡率均较高，2016年宫颈癌居河南省女性恶性肿瘤发病率第5位，死亡率第7位[8]。引起宫颈癌的HPV亚型分布具有地域性差异[9]，因此，研究河南省宫颈癌患者HPV感染的优势亚型对本地宫颈癌预防显得尤为重要。本研究旨在分析河南省2 110例宫颈癌患者HPV感染状况及其亚型分布。
对象与方法1. 研究对象：2015年3月至2020年4月在河南省人民医院就诊的河南籍宫颈癌患者。患者须同时符合以下标准方可纳入：①在河南省人民医院经病理检查首次确诊为宫颈癌的患者，且病理报告经2位病理科医师同时确认；②自愿接受HPV分型检测；③HPV检测前未经过任何抗肿瘤治疗。患者有以下情况之一者需剔除：①有子宫切除史或宫颈手术史，或盆腔放射治疗史；②之前进行过抗HPV治疗或接种过HPV疫苗；③进行HPV检测前标本放置时间过久。最终，符合要求的宫颈癌患者2 110例，其中鳞癌1 691例、腺癌350例、腺鳞癌69例。
2. 主要试剂及仪器：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、杂交试剂盒购自中国潮州凯普生物化学有限公司（凯普公司）；HybriMax医用核酸分子快速杂交仪购自凯普公司，MultiGene gradient型PCR扩增仪购自美国Labnet公司。
3. 标本采集及保存：标本采集前要求患者3 d内不使用阴道内药物或对阴道进行冲洗，24 h内无性行为，在非月经期内进行标本采集。使用凯普公司一次性宫颈细胞采集器，将宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转4~5圈，慢慢取出宫颈刷，将其放入加有专用细胞保存液的取样管中，于4 ℃保存，48 h内完成检测。
4. 基因分型：共检测37种HPV亚型，其中高危型21种：HPV16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、67、68、69、70、73、82；低危型16种：HPV6、11、34、40、42、43、44、54、55、57、61、71、72、81、83、84。检查方法：①HPV-DNA分离提取：取保存有宫颈细胞的细胞保存液0.5 ml至EP管，18 628 g离心3 min，弃上清，细胞保存液清洗沉淀，后加入细胞裂解液提取DNA，严格按照DNA提取试剂盒说明书进行操作。②PCR扩增：将PCRMix 23.25 μl、Taq酶0.75 μl、提取的DNA模板1 μl混匀成25 μl反应体系，瞬时离心后行PCR扩增，扩增程序：95 ℃ 9 min；95 ℃ 20 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，40个循环；72 ℃ 5 min。③导流杂交：将杂交膜平铺于杂交仪，PCR产物加于杂交膜之上进行HPV-DNA杂交分型，具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。
5. 九价HPV疫苗覆盖率：指HPV阳性的宫颈癌患者中，高危亚型检出且全部被九价HPV疫苗靶向者所占的比率，用以描述九价HPV疫苗对HPV阳性宫颈癌患者的假设预防效果。
6. 统计学分析：采用SPSS 23.0软件进行统计学分析，率的比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
结果1. HPV感染率及其亚型分布：2 110例宫颈癌患者中，检出HPV感染者1 856例，感染率为87.96%（95%CI：86.57%~89.35%）。所检测的37种HPV亚型中，除HPV57、71、83外，其他亚型均有检出。感染率最高的6个亚型依次为HPV16（60.19%，95%CI：58.10%~62.28%）、HPV58（9.43%，95%CI：8.18%~10.68%）、HPV18（8.63%，95%CI：7.43%~9.83%）、HPV52（6.54%，95%CI：5.49%~7.59%）、HPV35（6.16%，95%CI：5.13%~7.19%）、HPV33（5.07%，95%CI：4.13%~6.01%）。见表 1，2。
2. HPV阳性患者感染类型：1 856例HPV阳性的宫颈癌患者中，以单一感染为主（77.48%），二重感染次之（16.76%）。见表 3。单一感染中，仅10例为低危型HPV感染；多重感染中，仅2例为单纯低危型HPV感染。
3. HPV16亚型在多重感染宫颈癌患者中的分布：包含HPV16亚型的多重感染宫颈癌患者共计287例，在多重感染中的占比为68.66%（287/418）。包含HPV16亚型的二重感染宫颈癌患者共计218例，在二重感染中的占比为70.10%（218/311）。311例二重感染的宫颈癌患者中，例数最高的5种亚型组合依次为HPV16+58（36例）、HPV16+52（30例）、HPV16+33（20例）、HPV16+18（18例）、HPV16+53（15例）。
4. 九价HPV疫苗对HPV阳性宫颈癌患者高危亚型的覆盖率：1 856例HPV阳性的宫颈癌患者中，高危亚型检出且被九价疫苗（靶向高危亚型HPV16、18、31、33、45、52、58）覆盖者1 599例，覆盖率为86.15%（1 599/1 856）。除HPV16亚型外，九价疫苗对宫颈癌HPV高危亚型覆盖率贡献较多的亚型依次为HPV58（8.67%）、HPV18（7.81%）、HPV52（5.71%）。
5. 宫颈癌患者年龄分布：2 110例宫颈癌患者年龄区间19~88岁，年龄（47.27±11.11）岁。宫颈癌患者在40~岁组分布较多，其次为30~和50~岁组，< 30岁组（85例）及 > 59岁组患者较少。见表 4。
6. 不同年龄组宫颈癌患者HPV亚型分布：不同年龄组HPV优势亚型前3位集中于HPV16、18、52、58。HPV16亚型在不同年龄组感染率均处于第一位，感染率均 > 50%。HPV18亚型在50~岁年龄组感染率较高（11.03%），HPV52亚型在20~岁年龄组感染率较高（10.71%），HPV58亚型在 > 59岁年龄组感染率较高（15.41%）。见表 5。不同年龄组间HPV阳性率差异无统计学意义（χ2=4.287，P=0.369）。
宫颈癌是严重威胁女性健康的第二大恶性肿瘤，也是目前癌症中唯一病因明确、可以早期预防和治疗的癌症。高危型HPV持续感染是宫颈癌和癌前病变的主要原因，而HPV亚型分布又具有地域性差异，因此，研究本地区宫颈癌患者HPV感染亚型将对当地宫颈癌预防工作提供支持和帮助[3-4, 9]。
本研究对来自河南省的2 110例宫颈癌患者HPV感染情况进行统计分析，HPV总体感染率为87.96%，感染率最高的6个亚型依次为HPV16、58、18、52、35、33，均为高危亚型。在世界范围内，HPV16和18亚型是引起宫颈癌的两个主要亚型，导致了70%的宫颈癌，且HPV16亚型所占比例更大[10]。本研究中HPV16亚型感染率处于主导地位，HPV18亚型处于第三位，与世界范围情况有所不同。WHO最新流行病学数据显示，除广泛流行的HPV16、18亚型外，HPV58、52及33亚型在亚洲地区及中国宫颈癌中检出率较高，明显高于全球水平[1-2]。本研究与之一致，且HPV58亚型检出率位居第二位，超过了HPV18亚型。Shen等[11]采用液态芯片技术对河南省50例宫颈癌患者进行HPV分型检测，得出的HPV优势亚型依次为HPV16、18、33、58、52。除HPV16亚型均位于第一位外，其他优势亚型的顺序与我们的研究有所不同，其原因可能为宫颈癌患者数量及HPV分型检测方法不同。
一项来自湖南地区宫颈癌患者的研究表明，其HPV优势亚型为HPV16、58、52、18、33[12]；另一项来自北京地区对828例宫颈癌患者的研究表明，其HPV优势亚型为HPV16、58、33、18、52[13]。本研究与之相比，共同之处是HPV16、58亚型均处于前两位，不同之处是后面的亚型顺序有所不同，这可能与HPV亚型分布的地域性差异有关[9]。
在1 856例HPV阳性的宫颈癌患者中，以单一感染为主，多重感染所占比例较小，这与多数研究结果相一致[10-14]。HPV16亚型无论在单一感染还是多重感染中都占有主导地位。
九价疫苗所靶向的HPV高危亚型中，除HPV16亚型外，HPV58、18、52是对宫颈癌HPV高危亚型覆盖率贡献较多的重要亚型，HPV45亚型的覆盖率最低。2 110例宫颈癌患者感染率最高的6个亚型（HPV16、58、18、52、35、33）中，除HPV35外，其余5个亚型均被九价疫苗所靶向，因此在推广九价疫苗预防宫颈癌的同时，应重视HPV35亚型的筛查。
宫颈癌患者在40~岁组分布较多，< 30岁及 > 59岁组患者较少。这与湖南地区的研究结果一致[12]。一项基于中国人群2000-2014年癌症登记数据的研究显示，女性宫颈癌发病率高峰从 > 70岁变为40~岁，呈年轻化的趋势[15]。本研究结果与之一致，说明40~岁女性是宫颈癌筛查预防的重点。随着社会的发展和人们观念的转变，女性性生活开始时间提前，年轻女性成为HPV感染的高危人群，感染年龄也随之提前，导致宫颈癌发病年龄提前。
就HPV阳性率而言，20~岁组最高，> 59岁组最低，但不同年龄组之间差异并无统计学意义。HPV16亚型在不同年龄组宫颈癌患者中感染率均处于第一位，且感染率均 > 50%，说明针对不同年龄组女性，HPV16亚型都是需要预防和关注的重点。除HPV16亚型外，HPV18、52、58亚型占据着不同年龄组宫颈癌患者优势亚型的第2、3位。
本研究存在局限性。第一，由于腺癌和腺鳞癌患者较少，未进行不同病理类型宫颈癌患者之间HPV优势亚型的比较。第二，患者感染的HPV亚型可能没有包括在本研究涉及的37种HPV亚型中，导致一些亚型无法检出，出现假阴性。
综上所述，来自河南省的2 110例宫颈癌患者HPV感染的优势亚型依次为HPV16、58、18、52、35、33，HPV16亚型感染率远高于其他亚型。宫颈癌患者以单一HPV感染为主，二重感染次之。2 110例宫颈癌患者主要分布于40~岁组，应对此年龄组女性加强筛查。本研究中，九价疫苗对HPV阳性宫颈癌患者高危亚型的覆盖率可达86.15%。本研究将为本地区宫颈癌预防工作提供帮助和支持。
利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突
| [1] |
ICO/IARC. HPV Information Centre: World Human Papillomavirus and Related Diseases Report[R]. 2019.
|
| [2] |
ICO/IARC. Information Centre: China Human Papillomavirus and Related Diseases Report[R]. 2019.
|
| [3] |
Crow JM. HPV: The global burden[J]. Nature, 2012, 488(7413): S2-3. DOI:10.1038/488S2a |
| [4] |
Junior BPVC, Guimarães MDC, Lopes APC, et al. Incidence of cervical human papillomavirus and cervical intraepithelial neoplasia in women with positive and negative HIV status[J]. Rev Bras Ginecol Obstet, 2016, 38(5): 231-238. DOI:10.1055/s-0036-1583294 |
| [5] |
Ranjeva SL, Baskerville EB, Dukic V, et al. Recurring infection with ecologically distinct HPV types can explain high prevalence and diversity[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2017, 114(51): 13573-13578. DOI:10.1073/pnas.1714712114 |
| [6] |
Muñoz N, Bosch FX, de Sanjosé S, et al. Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J]. N Engl J Med, 2003, 348(6): 518-527. DOI:10.1056/NEJMoa021641 |
| [7] |
Argyri E, Papaspyridakos S, Tsimplaki E, et al. A cross sectional study of HPV type prevalence according to age and cytology[J]. BMC Infect Dis, 2013, 13: 53. DOI:10.1186/1471-2334-13-53 |
| [8] |
陈琼, 刘曙正, 郭兰伟, 等. 2016年河南省恶性肿瘤的发病与死亡分析[J]. 中国肿瘤, 2020, 29(8): 571-578. Chen Q, Liu SZ, Guo LW, et al. Cancer incidence and mortality in Henan province, 2016[J]. China Cancer, 2020, 29(8): 571-578. DOI:10.11735/j.issn.1004-0242.2020.08.A003 |
| [9] |
Guan P, Howell-Jones R, Li N, et al. Human papillomavirus types in 115789 HPV-positive women: a Meta-analysis from cervical infection to cancer[J]. Int J Cancer, 2012, 131(10): 2349-2359. DOI:10.1002/ijc.27485 |
| [10] |
de Sanjose S, Quint WGV, Alemany L, et al. Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer: a retrospective cross-sectional worldwide study[J]. Lancet Oncol, 2010, 11(11): 1048-1056. DOI:10.1016/S1470-2045(10)70230-8 |
| [11] |
Shen Y, Gong JM, Li YQ, et al. Epidemiology and genotype distribution of human papillomavirus (HPV) in women of Henan Province, China[J]. Clin Chim Acta, 2013, 415: 297-301. DOI:10.1016/j.cca.2012.11.005 |
| [12] |
Wang LQ, Wu BP, Li JJ, et al. Prevalence of human papillomavirus and its genotype among 1336 invasive cervical cancer patients in Hunan province, central south China[J]. J Med Virol, 2015, 87(3): 516-521. DOI:10.1002/jmv.24094 |
| [13] |
Xiao MZ, Xu QX, Li HY, et al. Prevalence of human papillomavirus genotypes among women with high-grade cervical lesions in Beijing, China[J]. Medicine, 2016, 95(3): e2555. DOI:10.1097/md.0000000000002555 |
| [14] |
Liu W, Wu EQ, Yu XH, et al. Detection of human papillomavirus genotypes associated with mucopurulent cervicitis and cervical cancer in Changchun, China[J]. Int J Gynecol Obstet, 2013, 120(2): 124-126. DOI:10.1016/j.ijgo.2012.07.032 |
| [15] |
Li XT, Zheng RS, Li XM, et al. Trends of incidence rate and age at diagnosis for cervical cancer in China, from 2000 to 2014[J]. Chin J Cancer Res, 2017, 29(6): 477-486. DOI:10.21147/j.issn.1000-9604.2017.06.02 |